20260916-01-实验记录

今日实验概况

今日开始对已完成基线行为学检测及分组的38只慢性迷走神经电极植入小鼠进行正式实验干预。38只小鼠采用 2×2 设计，分别为 Control+Sham、Control+VNS、CRS+Sham 及 CRS+VNS 四组。其中两组 VNS 组各10只，两组 Sham 组各9只。

今日主要完成两部分实验：一是对两组 CRS 小鼠进行首次慢性束缚应激造模；二是对两组 VNS 小鼠进行迷走神经刺激。整体实验过程顺利，未出现明显意外情况。

实验流程

一、CRS造模

今日12:00—14:00，对 CRS+Sham 及 CRS+VNS 两组小鼠进行束缚应激，每只持续2 h。

束缚装置采用50 mL离心管改造。根据小鼠体位及通气需要对离心管进行开孔处理，小鼠置入后头部朝向离心管锥形底端，尾部朝向管盖并由开孔处伸出。

由于本批小鼠头部留置有慢性迷走神经刺激电极，束缚过程中将离心管对应小鼠头部的一端适当抬高，使尾部位置相对较低，以尽量减少排泄物向头部移动造成电极及头帽区域污染。

本次CRS持续2 h，各小鼠均顺利完成束缚，过程中未发现明显意外情况。

图1. CRS+Sham组小鼠束缚应激造模场景

图2. CRS+VNS组小鼠束缚应激造模场景

二、VNS刺激

第一部分CRS完成，随后对两组 VNS 小鼠进行迷走神经刺激。今日对 Control+VNS 及 CRS+VNS 两组小鼠进行迷走神经刺激。其中，CRS+VNS 组在当日2 h CRS 造模结束后进行VNS。

刺激系统

刺激源采用 QLS3900 压力刺激器，可恒压输出0–20 V电压，支持自定义波形。刺激电路将 QLS3900 与一个1000 Ω 电阻串联，再与小鼠串联。使用自带电池的万用表测量电阻两侧压降，根据欧姆定律（I = V/R），电阻上1 V压降对应电路中1 mA电流。

图5. QLS3900刺激源参数设置界面

刺激参数

刺激波形：双相对称脉冲； 单相峰值电流：±300 μA（峰-峰值600 μA）； 频率：30 Hz； 脉宽：500 μs/phase； 刺激方式：连续刺激； 刺激时间：5 min/只。

图4. 示波器显示刺激频率30Hz波形

刺激过程

刺激过程中，小鼠置于标准饲养笼内，不进行额外固定或活动限制，可在笼内自由活动。刺激通过已植入的慢性迷走神经电极完成。

图3. VNS刺激过程中小鼠笼内自由活动状态

刺激过程中连接及波形输出正常。小鼠可在笼内自由活动，未观察到明显呼吸异常或其他严重不良反应。实际观察中，部分小鼠在 VNS 期间自主活动较刺激前减少，整体状态相对安静，但仍可正常行走和探索。该现象目前仅作为实验过程观察记录，不作功能性解释。

三、波形及原始资料留存

今日刺激过程中留存了部分小鼠的实际刺激波形截图，用于记录刺激器输出及慢性植入电极工作状态。

考虑到后续实验需连续进行14 d，目前计划不要求每天对全部动物逐只保存波形截图，而是在日常实验过程中留存部分代表性动物的实际输出波形，同时在重要时间节点重点保存相关资料。

如后续出现电极接触异常、刺激波形异常或动物反应明显异常，将单独进行记录并保留相应原始资料。

实验总结

1. 今日完成两组 CRS 小鼠（CRS+Sham 9只、CRS+VNS 10只）的首次慢性束缚应激造模，每只2 h，过程顺利。
2. 今日完成两组 VNS 小鼠（Control+VNS 10只、CRS+VNS 10只）的迷走神经刺激，刺激参数符合预设方案，过程正常。
3. 整体实验未出现明显意外情况，小鼠状态稳定。